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Endothelin 3 對雞隻胚胎黑色素母細胞分佈之影響

為了解決Masaki Matsushima 台中的問題，作者陳郁元 這樣論述：

色素過度沈澱（hyperpigmentation）為絲羽烏骨雞（Silky）外貌重要特徵之一，原因是由於成年烏骨雞之腸繫膜、腹膜等結締組織有大量黑色素細胞（melanocytes）存在。黑色素細胞源自於具分化多能性（pluripotent）之神經嵴細胞（neural crest cells），於雞胚胎發育第15-16期，神經嵴細胞會沿著神經管（neural tube）與骨節（sclerotome）之間空隙的腹側路徑（ventral pathway）遷徙到達腹側體節，並分化為神經元與神經膠原細胞（neurons and glial cells）；於第21-22期時，神經嵴細胞先分化成黑色素母細

胞（melanoblasts）後，再沿著皮肌節（dermamyotome）與外胚層（ectoderm）之間的背側路徑（dorsolateral pathway）遷徙，隨後侵入表皮再分化成黑色素細胞。而烏骨雞胚胎於發育過程中，黑色素母細胞的遷移會同時進入背側與腹側路徑，故導致其色素過度沈澱。由於研究指出黑色素母細胞的遷徙與增殖，可受到Endothelin 3（EDN3）調控，因此，本論文之研究目的為探討於神經嵴細胞遷徙時期，EDN3與Endothelin receptors B2（EDNRB2）於烏骨雞以及L2品系土雞之表現與分佈狀況，並瞭解EDN3於色素過度沉澱現象所扮演之角色。結果顯示，烏骨

雞胚胎EDN3之表現，於神經嵴細胞遷徙時期均顯著高於同一時期L2品系土雞胚胎之表現量，且烏骨雞胚胎之EDNRB2於開始進行背側遷徙之第22期與第28期亦均高於L2胚胎之表現。EDN3於L2胚胎表現位置幾乎都集中於背側路徑；反之，於烏骨雞胚胎中，EDN3表現位置遍佈於背側路徑與腹側路徑周邊之組織。將小鼠EDN3-RCAS反轉錄病毒注射入L2品系土雞胚胎體節內，可讓小鼠EDN3於雞胚中表現，且黑色素母細胞可侵入受感染之雞胚體節內部，但孵化至第14天時，並未出現類似烏骨雞色素過度沉澱之現象。利用蛋白質體學之分析方法，比對絲羽烏骨雞與L2品系胚胎發育到第22期以及第28期胚胎所表現之蛋白質。結果顯示在

兩品種間表現量具顯著差異之蛋白質於第22期胚胎有30個，而第28期有59個蛋白質，其中於第22期可鑑定出身分之蛋白質有12個，而第28期則有24個。於烏骨雞胚胎內表現量高的蛋白質功能包括了氧化還原反應、細胞增殖、細胞老化、粒線體內蛋白質輸送以及大分子胜肽聚合等。本研究確認EDN3為造成絲羽烏骨雞之黑色素母細胞出現腹側遷移之關鍵因子，但後續分化成黑色素細胞以及維持黑色素細胞生長，可能還需要其他因素輔助以形成色素過度沉澱，而在神經嵴細胞遷徙時期，於絲羽烏骨雞與L2胚胎內表現具顯著差異之蛋白質則可提供進一步研究之方向。