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國立中正大學 生命科學系生物醫學研究所 陳浩仁所指導 蔡雅如的 微藻萃取物藉由下調節未摺疊蛋白質反應降低口腔癌細胞增生 (2017),提出zipper pouch large關鍵因素是什麼,來自於口腔癌、微藻、活性氧化物質、內質網壓力、未摺疊蛋白質反應。

而第二篇論文國立中興大學 食品暨應用生物科技學系所 胡淼琳所指導 楊智閔的 茄紅素酵素代謝產物apo-8’-lycopenal的化學預防作用:活化Nrf2-ARE轉錄系統、抑制癌細胞轉移以及抑制血管新生 (2011),提出因為有 血管新生、茄紅素、轉移、類紅血球衍生生長因子-抗氧化反應元件轉錄系統的重點而找出了 zipper pouch large的解答。

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微藻萃取物藉由下調節未摺疊蛋白質反應降低口腔癌細胞增生

為了解決zipper pouch large的問題,作者蔡雅如 這樣論述:

微藻內含有多種具生物活性的化合物,包含胡蘿蔔素、脂肪酸、醣脂質、多醣類、蛋白質與胜肽類。巨藻與微藻已被應用在抗癌研究中,許多藻類的粗萃取物或純化之化合物已顯示具有抗腫瘤之活性。在此研究中,我們使用Coelastrella sp. F50 (C. F50),一株分離自台灣的微藻的有機萃取物來探討其對兩株由本土患者所建立之口腔癌細胞株(OC2和OCSL)的抗癌效果。我們發現C. F50萃取物隨著時間與劑量的上升可以降低OC2及OCSL細胞的生存率,其半致死劑量約500 μg/ml。C. F50萃取物能抑制細胞遷移與上皮-間質型轉換(epithelial-mesenchymal transitio

n)及癌症幹細胞特性,也能增加細胞內的活性氧化物質(reactive oxygen species, ROS)。細胞內活性氧濃度上升通常亦會提升內質網壓力(ER stress)及未摺疊蛋白質反應(unfolded protein response, UPR)反應。令人意外地, C. F50萃取物雖能下調未摺疊蛋白質反應,卻能抑制細胞生長。我們推測C. F50萃取物可能會下調初期未摺疊蛋白質反應途徑,造成活性氧累積,因此容易觸發後期未摺疊蛋白質反應而造成細胞死亡。

茄紅素酵素代謝產物apo-8’-lycopenal的化學預防作用:活化Nrf2-ARE轉錄系統、抑制癌細胞轉移以及抑制血管新生

為了解決zipper pouch large的問題,作者楊智閔 這樣論述:

許多研究指出茄紅素在活體內外可藉由活化類紅血球衍生生長因子nuclear factor erythroid-derived 2-like 2 (Nrf2)-抗氧化反應元件antioxidant response element (ARE)轉錄系統、抑制癌細胞轉移以及抑制血管新生,在癌症化學預防與化學治療作用上扮演重要角色。茄紅素在肝臟中可藉由胡蘿蔔素氧合酶的作用,裂解形成類茄紅素(lycopenoids),例如apo-lycopenal、apo-lycopenol及apo-lycopenoic acid。在這些類茄紅素中,apo-8''-lycopenal存在於人體血漿以及含有茄紅素食物中,

為主要的茄紅素代謝產物之一。此外有研究指出茄紅素的化學預防與化學治療作用有部份來自於其代謝產物。雖然茄紅素及其代謝產物apo-10''-lycopenoic acid已被證實可藉由Nrf2-ARE轉錄系統,而誘導二期抗氧化/解毒酵素,因而具有癌症化學預防作用,然而目前對於apo-8''-lycopenal是否也具有相同效果仍不清楚。因此,我們首先以人類肝癌細胞(HepG2 cells)作為細胞模式,探討apo-8''-lycopenal對於類紅血球衍生生長因子-抗氧化反應元件轉錄系統所調控之二期抗氧化/解毒酵素的影響。結果發現apo-8''-lycopenal (1-10 μM):1) 可顯著

增加Nrf2由細胞質轉位到細胞核;2) ARE報導基因的活性;3) Nrf2與ARE結合能力;4) 細胞質中蛋白酶體活性,以及5) 下游二期抗氧化/解毒酵素如第一型血紅素氧化酶(heme oxygenase, HO-1)及NAD(P)H:quinine oxidoreductase 1 (NQO-1)的表現,但會降低細胞質中Kelch-like ECH-associated protein 1 (Keap1)蛋白質表現。利用RNA干擾技術使得Nrf2表現靜默化以及MAPK家族特異性抑制劑PD98059與SB230503,我們發現ERK/p38-Nrf2路徑參與了apo-8''-lycopena

l活化HO-1及NQO-1的表現,進而降低細胞內活性氧含量。此外,我們也發現茄紅素在活化Nrf2轉位到細胞核的時間較apo-8''-lycopenal慢,因此我們認為茄紅素的化學預防作用可能有部分來自於其代謝產物apo-8''-lycopenal。雖然活體內外研究發現茄紅素可抑制腫瘤轉移,但其代謝產物是否也有相同的效果所知甚少。因此我們利用具有高度轉移能力的肝癌SK-Hep-1細胞株作為試驗模式,比較apo-8''-lycopenal (1-10 μM)與茄紅素(10 μM)抑制肝癌細胞轉移的能力,並進一步探討apo-8''-lycopenal的抑制癌細胞轉移分子機制。結果顯示,apo-8''

-lycopenal及茄紅素可顯著抑制肝癌細胞侵襲(invasion)與移行(migration),並且在相同濃度下apo-8''-lycopenal抑制效果優於茄紅素。在分子機制上,apo-8''-lycopenal:1) 可顯著降低基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2及-9的活性及蛋白質表現;2) 增加抗轉移基因nm23H1及基質金屬蛋白酶內生性抑制劑(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase, TIMP)-1及-2的蛋白質表現;3) 抑制癌細胞移行相關蛋白質表現如Rho GTPase以及4) 抑制

黏著斑激酶所調控之訊號路徑如ERK/p38及PI3K-Akt路徑。這些結果意味apo-8’-lycopenal具有抑制肝癌細胞轉移的能力,而此抑制效果優於茄紅素,因此我們認為茄紅素的抑制癌細胞轉移的效果可能部份來自於其代謝產物apo-8''-lycopenal。Apo-8''-lycopenal除了可抑制癌細胞轉移外,我們也發現apo-8''-lycopenal可顯著降低肝癌細胞中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的含量。VEGF為內皮細胞特異型分泌性蛋白,在血管新生過程中扮演重要角色。因此我們更進一步探討apo-8''-lyc

openal對於血管新生的影響。我們利用離體外法分析法(如大鼠主動脈環),驗證apo-8''-lycopenal抑制血管新生的效果並與茄紅素比較,也利用人類臍靜脈內皮(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)細胞探討apo-8''-lycopenal在抑制血管新生作用上的分子機制。結果顯示,在大鼠主動脈環試驗中,apo-8''-lycopenal可顯著抑制新血管生成,而其抑制效果優於相同濃度的茄紅素。在分子機制上,apo-8''-lycopenal可顯著抑制HUVECs的脈管生成、移行及侵襲作用,而此抑制作用伴隨著向下調節血管內皮生長因子受

器(vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR)-2所調控之MMP-2活性及向上調節TIMP-2表現。這些結果顯示apo-8''-lycopenal在活體外與離體外具有抑制血管新生活性,而此抑制效果優於茄紅素,因此我們認為茄紅素的抑制血管新生作用可能部分來自於其代謝產物apo-8''-lycopenal。以上結果意味,apo-8''-lycopenal具有化學預防及化學治療的活性包括活Nrf2-ARE轉錄系統、抑制癌細胞轉移,以及抑制血管新生。此外,茄紅素的化學預防與化學治療活性可能部分來自於其代謝產物apo-8''-lycopenal

。本研究提供了茄紅素代謝產物之化學預防與化學治療的相關論證,可作為將來研發化學預防或化學治療試劑的依據。